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《蜂膠總黃酮的抗氧化及抗腫瘤活性研究》-遼寧中醫藥大學(xué)
時(shí)間:2025-05-05來(lái)源:本站原創(chuàng )瀏覽:153


蜂膠是工蜂采集各種植物芽、葉中的樹(shù)脂等分泌物與其上顎腺、蠟腺等分泌物混合后形成的具有芳香氣味的黏性固體膠狀物。蜂膠作為傳統藥品和保健品使用歷史非常悠久。國內外研究表明,蜂膠具有抗病毒、抗氧化、抗腫瘤及免疫調節等廣泛的生物活性,蜂膠中存在多類(lèi)化學(xué)成分,其中包括黃酮類(lèi)、酚酸類(lèi)、萜烯類(lèi)化合物等主要藥效成分。

姚靜等采用LC-IT-TOF-MS法進(jìn)行鑒別,發(fā)現中國蜂膠中含有高良姜素及酯類(lèi)、槲皮素及酯類(lèi)、短葉松素及酯類(lèi)、白楊素等20余種黃酮類(lèi)成分。
實(shí)驗研究表明,從多種天然藥物中得到的總黃酮類(lèi)提取物具有清除自由基、抗氧化、抗菌、抗病毒、保護心腦血管和抗腫瘤等作用,近年來(lái),蜂膠總黃酮(TFP)的藥理作用研究也廣受關(guān)注,但對其抗氧化和抗癌作用的研究報道較少。本實(shí)驗室前期研究表明,TFP具有顯著(zhù)的血管舒張作用,對全腦缺血-再灌注大鼠腦損傷具有明顯的保護作用。


目的:研究蜂膠總黃酮(TFP)的抗氧化活性及其對小鼠肝癌Hepa1-6細胞、人肺癌A549細胞和人胃癌SGC7901細胞增殖的抑制作用。

方法:通過(guò)測定TFP的總還原力及對1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)、羥基自由基和超氧陰離子自由基的清除能力,評價(jià)TFP的體外抗氧化活性;采用CCK-8法檢測蜂膠總黃酮抗腫瘤細胞增殖的能力。
結果:實(shí)驗結果表明,在25~150μg/mL濃度范圍內TFP具有較強的總還原力,對DPPH自由基、羥基自由基和超氧陰離子自由基的清除能力均呈現濃度依賴(lài)性增大,最大清除率分別為(72.47±3.13)%、(70.84±4.01)%和(68.24±4.56)%;50、100、200μg/mL的TFP對Hepa1-6、A549和SGC7901細胞的生長(cháng)均有明顯的抑制作用,且在24~72h時(shí)間范圍內的抑制作用隨時(shí)間延長(cháng)而逐漸增大。

結論:TFP在體外具有較強的抗氧化能力,且對Hepa1-6、A549和SGC7901細胞的生長(cháng)具有顯著(zhù)的抑制作用。

心腦血管系統、腫瘤等多種疾病和人類(lèi)的自然衰老都與氧自由基密切相關(guān)。黃酮類(lèi)化合物的抗自由基作用已經(jīng)得到大量實(shí)驗證實(shí),從天然藥物中篩選具有較強抗氧化活性的黃酮類(lèi)化合物已成為新藥研究與開(kāi)發(fā)重點(diǎn)關(guān)注的領(lǐng)域??傔€原能力測定以及DPPH自由基、超氧陰離子自由基、羥基自由基等清除率測定是評價(jià)天然活性成分體外抗氧化活性的常用方法。DPPH是一種人工合成的比較穩定的含氮自由基,其乙醇溶液在517nm處有特征吸收,外加抗氧劑可與DPPH結合,使其顏色和吸光度發(fā)生變化,可用于評價(jià)抗氧劑清除自由基的能力。通過(guò)Fenton反應產(chǎn)生的具有高反應活性的羥基自由基可與水楊酸結合,生成在510nm處有強烈吸收峰的2,3-二羥基苯甲酸。


在體系中加入可清除部分羥基自由基的物質(zhì)可減少吸收峰的形成,用分光光度法測定體系的吸光度值可反應自由基的含量,從而間接測定樣品的抗氧化能力。超氧陰離子是一類(lèi)重要的活性氧自由基,可誘導大分子物質(zhì)產(chǎn)生氧化損傷,因此通過(guò)測定對超氧陰離子自由基的清除作用可以評價(jià)物質(zhì)的抗氧化能力大小。本研究以蜂膠總黃酮為對象,通過(guò)體外抗氧化實(shí)驗評價(jià)了蜂膠總黃酮的抗氧化能力。

實(shí)驗結果表明,蜂膠總黃酮具有較強的總還原能力,對DPPH自由基、羥基自由基、超氧陰離子自由基均具有較強的清除能力,并在一定范圍內呈現濃度依賴(lài)性,其EC50值分別為71.01、73.63、84.85μg/mL,但總還原能力和自由基清除能力均弱于Vc。蜂膠總黃酮的抗氧化能力可能與其含有的高良姜素、短葉松素、白楊素等成分能調節體內黃嘌呤氧化酶、過(guò)氧化物酶、環(huán)氧合酶-2、誘導性一氧化氮合酶等活性物質(zhì)有關(guān)。

腫瘤是臨床發(fā)病率和病死率均較高的疾病之一,目前臨床使用的多數抗癌化療藥物毒性均較大,因此,開(kāi)發(fā)高效、低毒的天然抗腫瘤藥物已成為重要研究方向。近年來(lái)研究表明,多種天然藥物中提取出的黃酮類(lèi)化合物具有明確的抗腫瘤活性,其作用機制可能涉及誘導腫瘤細胞凋亡、清除自由基、抑制腫瘤血管生成等多種途徑。本實(shí)驗在研究蜂膠總黃酮抗氧化活性的基礎上,采用CCK-8法探討了蜂膠總黃酮對3種腫瘤細胞生長(cháng)的抑制能力。

研究結果表明,蜂膠總黃酮對Hepa1-6、A549和SGC79013種腫瘤細胞生長(cháng)均具有顯著(zhù)的抑制作用,且在總黃酮濃度50~200μg/mL范圍內、作用時(shí)間24~72h范圍內呈現出明顯的濃度和時(shí)間依賴(lài)性,200μg/mL蜂膠總黃酮在作用72h后對Hepa1-6、A549和SGC7901細胞的抑制率分別達到了(78.62±2.49)%、(84.68±3.45)%和(88.31±3.81)%。

腫瘤的發(fā)病機制眾多,有研究發(fā)現氧自由基與腫瘤的發(fā)生密切相關(guān),較多的致癌物在體內經(jīng)過(guò)代謝活化后形成自由基,在腫瘤發(fā)生過(guò)程中占有非常重要的角色,有效地控制自由基也是防止癌變的重要措施之一。因此,可以推測蜂膠總黃酮對腫瘤細胞增殖的抑制作用也可能與其抗氧化活性有關(guān)。

綜上所述,蜂膠總黃酮具有較好的體外抗氧化活性,總還原能力較強,對DPPH自由基、羥基自由基、超氧陰離子自由基具有較高的清除能力,而且蜂膠總黃酮能抑制腫瘤細胞的生長(cháng),對Hepa1-6、A549和SGC7901細胞增殖抑制作用均較強。

(來(lái)源:蜂膠總黃酮抗氧化和抗腫瘤活性研究,遼寧中醫藥大學(xué)學(xué)報. 2020,22(12))作者王啟海1,左堅2,梁楓1,裴文俊3,張夢(mèng)雨1(1.安徽中醫藥高等專(zhuān)科學(xué)校,安徽?蕪湖?241002;2.皖南醫學(xué)院附屬弋磯山醫院,安徽?蕪湖?241001;3.皖南醫學(xué)院安徽省重點(diǎn)實(shí)驗室,安徽?蕪湖?241002)
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